TOV21G細胞*人卵巢癌細胞系

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慧穎細胞庫提供的所有細胞僅供科研使用

原代細胞的培養是指直接從機體取下細胞、組織和器官后立即進行培 養；因此，較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養，此時的細胞保持原有細胞的基本性質，如果是正常細胞，仍然保留二倍體數。不同的原代細胞傳代次數不同，具體需咨詢客服人員或者自行查閱 相關資料。

細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得的具有特殊性質或標志的培 養細胞。從培養代數來講，理論上可培養到40-50代。

客戶應具有一定細胞培養知識與經驗，并具備基本培養條件（細胞培養實驗室，無菌操作臺、CO2培養箱，可拍照倒置顯微鏡等），并按說明書要求準備好相應的無菌的培養基、血清、雙抗、細胞培養瓶、培養板等。如果因客戶缺少基本培養經驗和培養條件而導致細胞死亡或污染，不在我司售后責任之內。

產品名稱：TOV21G細胞*人卵巢癌細胞系

生長狀態：貼壁生長|懸浮生長|半貼壁半懸浮生長

細胞形態：上皮樣|成纖維樣|圓形|不規則

培養條件：DMEM|1640|MEM|IMDM+10% FBS

細胞規格：5-10×105細胞量

庫存狀態：現貨

運輸方式：新鮮細胞或凍存細胞

質控：無支原體、無污染、符合標準

潔凈區，并不是沒有細菌，而是細菌的數量非常少，國家標準100級的潔凈標準是浮游菌數不得超過5個每立方米，沉降菌數不得超過1個每培養皿.而國外的標準比我國的還要高一點，要求的數量更少。在我們的潔凈操作臺里，并不是真正一個細菌都沒有的，所以在操作的時候還是要盡量利索迅速地完成操作。盡量減少進入培養體系細菌的數量。 處理細菌污染的重要原則就是：無限地稀釋細菌的濃度，無限地減少細菌的數量！ 1）.將污染的培養液倒掉，轉燒瓶口，加入10mlPBS，適當晃動清洗培養瓶，然后倒掉。轉燒瓶口。  2）.繼續加入10mlPBS，同樣方法晃動，清洗培養瓶，然后倒掉。 3）.繼續加入5mlPBS，同樣方法洗瓶，主要是培養面，然后倒掉。 4）.重復步驟3再洗。 5）.重復步驟3再洗。  6）.加入3-5ml雙抗，洗瓶，靜置3-5分鐘，然后吸出。 7）.加入3ml雙抗，洗瓶，靜置3-5分鐘，然后吸出。 8）.再加入5mlPBS洗瓶，然后吸出。  9）.加入10ml培養液，加入2ml雙抗，放置培養箱培養，5小時之后，倒掉培養基，加入PBS洗瓶兩次，然后加入胰酶消化，吹打后置于離心機800-1000r/min離心，然后洗一次。置于新的培養瓶里培養，培養體系加入2ml雙抗。  10）.24h之后，視情況換液，若仍然污染嚴重，培養基渾濁，重復以上步驟，若看不到污染物，則繼續步驟1)、3）、4）、6）、8），然后加入培養液培養，培養體系加入2ml雙抗.  11).24h之后，若仍污染嚴重，可再重復一次，若還污染只能棄之（不過一般沒有出現這種情況），若鏡下不見污染物，則換液PBS洗瓶，正常培養。  以上是對于細菌污染（常見為金黃色葡萄球菌和大腸桿菌）；若為霉菌或者真菌污染，加入兩性霉素B清洗和培養，終濃度一般為2.5μg/ml（在30μg/ml時會有細胞毒性）。另外也可以選擇在培養基里加3ug/ml的制霉菌素或放線菌素D。其它操作同；若為支原體或者黑膠蟲污染，基本上都是重新弄細胞了。對于黑膠蟲污染，我們會預防為主。以上方法主要是針對貼壁生長的細胞，在操作的過程中，一定要小心操作動作，輕柔緩慢，切忌大動作魯莽。防止細胞脫落。

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