PANC1 細胞,人胰腺癌細胞 價格/說明書

現貨供應：PANC1 細胞,人胰腺癌細胞 價格/說明書，詳細信息如下：

細胞生長：貼壁生長

細胞形態：上皮樣

細胞數量：1×106個細胞數

細胞傳代：1:3~1:6傳代每周換液2~3次

細胞純度：94％

細胞活力：90％（ViabilitybyTrypanBlueExclusion）

細胞檢測：細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌

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操作臺的滅菌處理：

1)無菌室及無菌操作臺(laminarflow)用紫外燈照射30-60分鐘滅菌，70%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風扇運轉10分鐘。

2)細胞用的培養基如有相同切記不可共享培養基，以避免失誤混淆或細胞間污染。 (注：實驗操作應在抬面之中央無菌區域，勿在邊緣之非無菌區域操作。)

培養細胞將復合細胞計數要求的細胞懸液分裝入培養瓶內，將培養瓶放入37℃和5%CO2的培養箱內2-4小時(或者24-48小時)后換液繼續培養培養，換液的時間由細胞情況而定。

PANC1 細胞,人胰腺癌細胞 價格/說明書 簡單信息：

細胞來源：  人胰腺癌細胞

細胞簡介：  PANC-1人胰腺癌細胞，來源于人胰腺癌，中文名為人胰腺癌細胞，正常的細胞形態為上皮樣，貼壁生長。

培養基：    DMEM 90%, Fetal Bovine Serum 10%

培養條件：  37℃ 5% CO2

消化條件：  0.25% (w/v) Trypsin-0.53 mM EDTA溶液，消化3-5min

傳化比例：  1：2-1：4

換液時間：  2-3天換液一次

凍存液比例：    85%培養基，10%FBS, 5% (v/v) DMSO

凍存密度：  1-3 ×10^6/管，液氮保存

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PANC1 細胞,人胰腺癌細胞 價格/說明書的培養

【初代培養原理】

將動物機體的各種組織從機體中取出，經各種酶（常用胰蛋白酶）、螯合劑（常用EDTA）或機械方法處理，分散成單細胞，置合適的培養基中培養，使細胞得以生存、生長和繁殖，這一過程稱原代培養。

儀器：培養箱（調整至37℃），培養瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、紗布、手術器械、血球計數板、離心機、水浴箱（37℃）

材料：動物組織塊

試劑：1640培養基（含20%小牛血清），0.25%胰酶，Hank′s液，碘酒

【初代消化培養法】

（1）準備：取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

（2）布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

（3）處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青鏈霉素的混合液中30~60分鐘。

（4）剪切：用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊，以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的胰蛋白酶液，然后一并倒入三角燒瓶中，結扎瓶口或塞以膠塞。

（5）消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

（6）分離：在消化過程中見消化液發混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500~1000轉/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養液。

（7）計數：用計數板計數，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養液調整后，分裝入培養瓶中。對大多數細胞來說，pH要求在7.2~7.4范圍，培養液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO23調整。

（8）培養：置于36.5℃溫箱培養，如用CO2溫箱培養，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。

【初代組織塊培養法】

《1》剪切：把組織小塊置于小燒杯或青霉素小瓶中，用Hanks液漂洗二三次以去掉表面血污，吸靜Hanks液，用眼科剪反復剪切1mm3塊為止。

《2》擺布：用彎頭吸管吸取若干小塊，置于培養瓶中，用吸管彎頭把組織小塊擺布在培養瓶底部，小塊相互距離以0.5cm為宜，每一25ml培養瓶底可擺布20~30塊。

《3》輕輕翻轉培養瓶，另瓶底向上，注意翻瓶時勿另組織小塊流動，塞好瓶塞，置36.5℃溫箱培養2小時左右（勿超過4小時），使小塊微干涸。

《培養》從微箱中取出培養瓶，開塞，46度斜持培養瓶，箱瓶底腳部輕輕注入培養液少許，然后緩緩再把培養瓶翻轉過來，讓培養液慢慢覆蓋附于瓶地上的組織小塊。置溫箱中靜止培養。待細胞從組織塊游出數量增多后。再補加培養液。

【傳代培養法原理】

細胞在培養瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細胞能繼續生長，同時也將細胞數量擴大，就必須進行傳代（再培養）。 傳代培養也是一種將細胞種保存下去的方法。同時也是利用培養細胞進行各種實驗的必經過程。懸浮型細胞直接分瓶就可以，而貼壁細胞需經消化后才能分瓶。

【材料和試劑】

1）細胞：貼壁細胞株

2）試劑：0.25％胰酶、1640培養基（含10％小牛血清）

3）儀器和器材：倒置顯微鏡，培養箱、培養瓶、吸管、廢液缸等

【操作步驟】

1）吸除培養瓶內舊培養液。

2）向瓶內加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。

3）置溫箱中2~5分鐘，當發現細胞質回縮，細胞間隙增大后，立即終止消化。

4）吸除消化液，向瓶內注入Hanks液數毫升，輕輕轉動培養瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細胞時，動作要輕，以免把已松動的細胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液單獨消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養液。

5）用吸管吸取營養液輕輕反復吹打瓶壁細胞，使之從瓶壁脫離形成細胞懸液。

6）計數板計數后，把細胞懸液分成等份分裝入數個培養瓶中，置溫箱中培養。

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