S-180細(xì)胞，小鼠肛門肉瘤細(xì)胞

S-180細(xì)胞，小鼠肛門肉瘤細(xì)胞   培養(yǎng)需注意：

細(xì)胞培養(yǎng)實驗所需的物品、器材應(yīng)進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌或購買無菌的一次性物品。玻璃瓶可擰松瓶蓋滅菌（指高壓蒸汽滅菌，以下同）或用鋁箔紙包住瓶口，和瓶蓋分別滅菌。其它玻璃和金屬器材用鋁箔紙包裹進(jìn)行滅菌。玻璃吸管應(yīng)塞上棉花球滅菌，然后置于烘箱中烘干。不適于進(jìn)行高壓滅菌的瓶塞等其它物品，可浸泡在70%酒精中進(jìn)行滅菌，然后在超凈工作臺上吹干。細(xì)胞培養(yǎng)液和其它不適于高壓滅菌的溶液，應(yīng)通過過濾（采用0.22μm的孔徑的濾膜）滅菌。無菌培養(yǎng)室每天都要用0.2%的新潔爾滅拖地面一次，并用紫外線照射滅菌30分鐘。超凈工作臺每次使用前用70%酒精擦拭，然后紫外線照射30分鐘。

進(jìn)入無菌操作室要求穿著無菌工作服、工作帽、口罩。開始工作前用70%酒精對手、前臂及乳膠手套進(jìn)行消毒。細(xì)胞培養(yǎng)等操作應(yīng)在超凈工作臺或有空氣過濾器的空間內(nèi)進(jìn)行。操作前點燃酒精燈，細(xì)胞培養(yǎng)的所有操作，如打開或關(guān)上試管或培養(yǎng)瓶蓋等，都要靠近酒精燈并經(jīng)過短時間的灼燒。燒過的實驗器械，冷卻后才能使用。已吸過培養(yǎng)液或其它有機(jī)液體的吸管不得再用火焰燒灼。不同液體分別用不同的吸管吸取，不能混用。開蓋后的培養(yǎng)瓶盡量避免垂直放置，同時瓶蓋應(yīng)扣放在超凈工作臺上，以減少落入細(xì)菌的機(jī)會。細(xì)胞培養(yǎng)物在處理和使用前，不要過早暴露于空氣中。在進(jìn)行轉(zhuǎn)移液體操作時，移液器不能觸及瓶口以避免細(xì)菌污染或交叉污染。放置吸管時管口向下傾斜，以防止液體倒流引起污染。培養(yǎng)細(xì)胞的廢棄用品，應(yīng)放入可封裝的容器內(nèi)。

S-180細(xì)胞，小鼠肛門肉瘤細(xì)胞  的凍存

細(xì)胞凍存的原則是要逐步緩慢降溫，以避免細(xì)胞內(nèi)部形成冰晶對細(xì)胞造成傷害。
1) 貼壁細(xì)胞經(jīng)消化、離心收集，懸浮細(xì)胞經(jīng)離心收集；
2) 大約10⁶個細(xì)胞加入1ml凍存液（細(xì)胞培養(yǎng)液和10%DMSO），用吸管吹打，使細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液；
3) 加入到凍存管中。如用1.8ml的凍存管，每管不要加入超過1.5ml的細(xì)胞懸液；
4) 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞名稱及凍存日期；
5) 用厚布或衛(wèi)生紙包裹凍存管，置于4℃半小時，然后置于-20℃兩小時，再置于-40℃兩小時，然后置于液氮上方置夜；第二天將細(xì)胞置于液氮中；如果僅想提取細(xì)胞內(nèi)的東西可以直接放在-20度的冰箱中。
6) 記下凍存管存放的位置，作好凍存記錄。

 其他細(xì)胞：

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HOPC細(xì)胞  RHh細(xì)胞   HESMC細(xì)胞 HBdSF細(xì)胞HOPC-os細(xì)胞   BHK-21細(xì)胞HGSMC細(xì)胞 HPEpiC細(xì)胞HO細(xì)胞  RNs細(xì)胞   HIMEC細(xì)胞 BHK-21細(xì)胞HSC細(xì)胞   RSCMN細(xì)胞 HISMC細(xì)胞 HPSMC細(xì)胞HPNC細(xì)胞   RDSCI細(xì)胞   HCMEC細(xì)胞HCO細(xì)胞HA細(xì)胞    RVSCI細(xì)胞 HCSMC細(xì)胞 HS細(xì)胞Hac細(xì)胞   ROPC細(xì)胞  HPMEC細(xì)胞    HNPC細(xì)胞HA-sp細(xì)胞   RSC細(xì)胞   HPAEC細(xì)胞 HAFC細(xì)胞HA-h細(xì)胞RPNF細(xì)胞  HPASMC細(xì)胞    HHSEC細(xì)胞HM細(xì)胞   RA細(xì)胞 HPAF細(xì)胞  HH細(xì)胞

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