ELISA試劑盒用于胃蛋白酶原I檢測

【實驗原理】     該ELISA的設(shè)計，研發(fā)和生產(chǎn)的目的是對人血漿樣品中的胃蛋白酶原I濃度進行定量檢測。ELISA試劑盒它是用兩個單抗與豬ELISA試劑盒人胃蛋白酶原I的不同抗原表位相結(jié)合，而不和胃蛋白酶原II發(fā)生交叉反應(yīng)的“雙抗體夾心”上海ELISA試劑盒
技術(shù)。

將含有胃蛋白酶原I的標準品、ELISA試劑盒價格質(zhì)控品、和待測樣品加入鏈霉親和素包被的微孔板中。隨后，將生物素偶聯(lián)的抗體和辣根過氧化酶（HRP）標記的胃蛋白酶原I特異抗體混合物禽ELISA試劑盒添加到各個孔中。白介素ELISA試劑盒經(jīng)過*個保溫孵育期，形成了“鏈霉親和素-生物素抗體—胃蛋白酶原I—HRP抗體”的“雙抗體夾心”結(jié)構(gòu)，生物素偶聯(lián)抗體和“雙抗體夾心”結(jié)構(gòu)被微孔板的內(nèi)壁吸附住。各孔中的游離蛋白質(zhì)和游離HRP標記抗體在洗滌過程中被沖走。將微孔板在基質(zhì)溶液中孵育一段時間，然后在酶標儀下測量。微孔板內(nèi)壁的示蹤抗體與胃蛋白酶原I的連接酶活性與樣本中的胃蛋白酶原I的濃度成正比。根據(jù)標準品中不同的胃蛋白酶原I的濃度，按照“點到點”，“立體曲線”或者“4-參數(shù)法”繪制標準曲線。待測樣品中的人胃蛋白酶原I的濃度可以直接從標準曲線上讀取。

 簡要實驗步驟：
1、添加25?L的標準品、質(zhì)控品和病人樣本到的孔中；
2、在各孔中添加100?L抗體混合物；
3、將溶液混合，然后用封口膜蓋住，室溫下孵育1小時；
4、將各孔清洗5次；
5、在各孔中添加100 ?L的ELISA HRP 基質(zhì)；
6、用封口膜封住微孔板，室溫下孵育20分鐘；
7、在各孔中添加100?L終止液；
8、讀取450nm處的吸光度。

【預(yù)期用途】
該ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測定）試劑盒是用來定量檢測血清中人胃蛋白酶原I的濃度。血清中人胃蛋白酶原I的檢測，對診斷胃粘膜分泌酸的功能狀況有重要作用。

【生理學簡介】
胃蛋白酶原含有一條多肽鏈，該肽鏈有375個氨基酸，其平均分子量為42kDa。胃蛋白酶原I在胃部中的胃粘膜主細胞和頸粘液細胞中合成，胃蛋白酶原II不僅能在胃粘膜主細胞和頸粘液細胞中合成，還能在近端十二指腸腔和十二指腸腺等的干凈粘液細胞中合成。臨床上，可以通過檢測胃蛋白酶原I和胃蛋白酶原II的濃度，診斷嚴重萎縮性胃炎。萎縮性胃炎和腸化生是胃癌的癌前期病變，因此確診萎縮性胃炎是診斷早早期胃癌或可治愈的胃癌的有效手段。血清中胃蛋白酶原的測定可作為“血清活組織檢測”，診斷是否患有萎縮性胃炎和淺表性胃炎。

萎縮性胃炎：若血清中胃蛋白酶原I水平低于25ng／ml則可確定為萎縮性胃炎。同時可以觀察到隨著萎縮性胃炎患者的粘膜損傷程度加劇，血清胃蛋白酶原Ｉ水平下降。早期萎縮性胃炎的血清胃蛋白酶原Ｉ水平的診斷靈敏性和特異性分別為92％和90％。另一方面，惡性貧血患者和萎縮性胃炎患者的血清胃蛋白酶原Ｉ濃度下降，而胃蛋白酶原II濃度不變或者升高。因此，萎縮性胃炎患者的胃蛋白酶原I/II的比例顯著低于淺表性胃炎患者或正常胃粘膜者。

胃癌：ELISA試劑盒胃癌患者中的血清胃蛋白酶原Ｉ水平和胃蛋白酶原I／II比例都很低，胃蛋白酶原Ｉ水平低和胃蛋白酶原I／II比值小的群體，患胃癌可能性為其他人的三倍。此外，血清胃蛋白酶原Ｉ水平低的群體可能比其他人更易患腸化生型胃癌。

十二指腸潰瘍：低血清胃蛋白酶原Ｉ濃度可以排除十二指潰瘍的診斷。盡管在臨床上，單一高胃蛋白酶原Ｉ豬ELISA試劑盒濃度對確定十二指腸潰瘍ELISA試劑盒價格的診斷作用很小，上海ELISA試劑盒然而，若高胃泌素血癥患者的血清胃蛋白酶原Ｉ禽ELISA試劑盒濃度偏高,則患有胰原性潰瘍病綜合征白介素ELISA試劑盒（Zollinger-Ellison綜合征）的幾率很大。