人催產(chǎn)素受體ELISA檢測試劑盒操作注意事項

ELISA試劑盒試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

安全性：
1.   避免直接接觸終止液和底物A、B，一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2.   實難中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3.   不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
試劑的準(zhǔn)備：
1.   標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準(zhǔn)備，不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：
20
ng/ml
 （6號標(biāo)準(zhǔn)品）
 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul
10
ng/ml
 （5號標(biāo)準(zhǔn)品）
 100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
5
ng/ml
 （4號標(biāo)準(zhǔn)品）
 100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2.5
ng/ml
 （3號標(biāo)準(zhǔn)品）
 100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.25
ng/ml
 （2號標(biāo)準(zhǔn)品）
 100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
0.6
ng/ml
 （1號標(biāo)準(zhǔn)品）
 100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
0
ng/ml
 （空白對照）
 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul
 2.   洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋

試劑盒性能：
1.   靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
2.   特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。
3.   重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

人催產(chǎn)素受體ELISA檢測試劑盒操作步驟：
1.   使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2.   根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
3.   加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育45分鐘。
4.   甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
5.   每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6.   甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
7.   每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育5分鐘。避免光照。
8.   取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
9.   在450nm波長處測定各孔的OD值。

豬ELISA試劑盒結(jié) 果 判 斷 與 分 析：
1、  儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2、  以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的OTR標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的OTR含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度，再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，ELISA試劑盒價格再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。
3、  檢測值范圍： 0-20ng/ml
4、  人催產(chǎn)素受體ELISA檢測試劑盒敏感度：0.1ng/ml
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