ELISA法檢測HBV與金標快速法兩者相比較

　　探討hbv采用金標快速法與elisa法檢測的結果對比分析。方法 本次研究選擇我院體檢某校新生為對象,分別采用酶聯免疫吸附試驗（elisa）和金標快速法對hbv進行檢測,就臨床結果進行回顧性分析。結果 elisa法與金標快速法平行檢測hbv結果,經rpha法初篩,200份為hbsag陽性血清,對其分別使用elisa法與金標快速測試法對乙肝五項進行平行檢測,結果無明顯差異（p>0.05）。

    hbv五項指標2種方法檢測結果的總符合率分別為98.5%、99.5%、99%、96%、96.5%。以elisa為常規方法對金標快速測試法進行驗證,則金標法分別為99.5%、100%、98.5%、94.5%、95%敏感性。特異性分別為84.5%、99.5%、96.5%、96%、96%。結論 金標快速法更方便、簡單、準確、快速,在對乙肝病毒五項指標快速測定中較為適用,無需溫育、洗滌、終止等相對復雜的步驟,對儀器設備要求不高,可通過肉眼在15min后讀出結果,可將此方法用于健康查體、大規模流行病學調查中,特別是在各種內窺鏡檢查的術前,和健康人群的篩查,值得廣泛推廣應用。病毒性肝炎在臨床具有較強感染力、發病率較高,對人類健康造成嚴重威脅的傳染性疾病,其中危害zui大的是乙型肝炎（hbv）,hbv表面攜帶者至2002年止,據who初步估計有4億以上,其中約有1.3億發生在我國,且母嬰傳播所造成的感染約占30%～50%[1]。

    在對乙肝預后進行預測、流行病學調查、獻血人員篩查、公共環境衛生、乙型肝炎免疫水平等實驗室檢測中,乙型肝炎表面抗原（hbaag）、e抗原（hbeag）、抗心抗體（抗-hbc）、表面抗體（抗-hbs）、e抗體（抗-hbe）等實用項目檢測的方法較為重要。本次研究選擇我院體檢某校新生為對象,分別采用酶聯免疫吸附試驗（elisa）和金標快速法對hbv進行檢測,就臨床結果進行回顧性分析。

    1 資料與方法
    1.1 一般資料 本次研究對象4600例,行3～5ml靜脈血采集,將血清分離,初篩應用反向被動血球凝集試驗（rpha）的方法,將hbsag陽性的血清對乙肝hbaag、抗-hbs、抗-hbc、hbeag、抗-hbe分別用elisa和金標法平行進行檢測,隨機分為elisa法組200例,金標快速法組200例,2組對象在年齡、性別、病性、病程及hbeag檢測方面比較無統計學差異（p >0.05）,具有可比性。
    1.2 方法
    1.2.1 金標快速檢測法 血清（血漿）與乙肝抗體（抗原）內的相應抗原（抗體）特異性結合以金、銀、硒等為標志物,依據雙抗原（抗體）夾心原理,對該抗體（抗原）在經組織化學的呈色反應之后進行定性檢測。先從冰箱中在試驗前取出測試條,常溫1～2h放置后使用,依次在試驗前將hbv五項指標測試條的一端在盛有血清標本的試管中插入約5s,后取出在白紙上放置,對弱陽性結果等待10～15min行判斷,對強陽性結果在2min內即可觀察,zui遲不宜超過20min。結果判定:若有一條紅色線先后在測試條中段出現,則為陽性,若無紅色線出現為測試條失效或試驗失敗。

    1.2.2 elisa法 hbsag目前常用的免疫測定方法為elisa試驗,應用多克隆或單克隆抗體,針對hbaag的α決定簇,為雙抗體夾心模式,可行0.5ng/ml以下的測定。乙型肝炎在早期診斷指標為血清中檢出hbsag,除急性期外,在發生hbv感染后,大部分人無臨床表現。但hbsag可在血中檢出,這類人群為hbsag攜帶者。 hbv感染的標志為血清hbaag。

    1.3 統計學方法 采用spss13.0統計學軟件,計數資料行c2檢驗,p 0.05）,見表1。hbv五項指標2種方法檢測結果的總符合率分別為98.5%、99.5%、99%、96%、96.5%。以elisa為常規方法對金標快速測試法進行驗證,則金標法分別為99.5%、100%、98.5%、94.5%、95%敏感性。特異性分別為84.5%、99.5%、96.5%、96%、96%。

    2 討論
    慢性乙型肝炎在我國為高度流行區,在我國人口中,hbsag陽性者占8.83%,遠遠超出世界水平,hbv變異株近年來有研究出現使患者hbv感染復制狀況更難診斷,常有漏診發生[2]。熒光定量pcr為一項實時檢測技術,操作通過*閉管式進行,使擴增產物的污染大大減少,并使檢測的特異性提高,擴增產物或通過電腦自動讀數來行定量,使檢測的靈敏度提高,避免了普通pcr檢測方法的缺點[3]。

    因fprobe的加入,fq-pcr更加提高了產物熒光定量檢測的特異性,并可得出定量結果,減少了實驗步驟,并使操作進一步簡化,使自動化的程度增加。 膠體金標記抗體檢測細菌表面抗原是1997年有學者曾報道的方法,在多種病原微生物中成為重要的檢測手須,本次研究采用金標快速法對hbv五項進行檢查,并和elisa行平行試驗,總符合較高,且2種方法檢測結果無明顯差異性,與elisa法比較,金標快速法更方便、簡單、準確、快速,在對乙肝病毒五項指標快速測定中較為適用,無需溫育、洗滌、終止等相對復雜的步驟,對儀器設備要求不高,可通過肉眼在15min后讀出結果,可將此方法用于健康查體、大規模流行病學調查中,特別是在各種內窺鏡檢查的術前和健康人群的篩查,故在hbv五項指標快速測定中,金標快速法為較理想的方法,快速、使用簡單、準確性高,值得廣泛推廣應用。